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皂苷類活性成分積累分析?。。?/h1>
返回列表 來源:未知 發(fā)布日期:2021-06-02 10:26【

    多生于蔭蔽濕潤的環(huán)境,可見其對光照溫 度有一定的要求,關(guān)于不同光照條件對珠子參皂苷 類次生代謝產(chǎn)物積累及同工酶表達(dá)筆者還未見研 究,因此用光照調(diào)控試驗(yàn),以揭示珠子參中不同同工 酶與次生代謝產(chǎn)物積累的相關(guān)性,掌握珠子參的生 長發(fā)育規(guī)律,探討不同光照對珠子參生長以及皂苷 類次生代謝產(chǎn)物積累的影響。MGC - 300H 人工氣候箱( 上海一恒科學(xué)有限公 司) ,Waters 2695 高效液相色譜儀,BIO - RAD 電泳 儀及 BIO - RAD mini 垂直電泳槽( 美國伯樂公司) , GB204 型電子分析天平 ( 北京賽多利斯儀器系統(tǒng)有 限公司) ; KQ - 200KED 超聲波清洗機(jī) ( 江蘇昆山超 聲波儀器有限公司) ; GZX - 9140MBE 電熱鼓風(fēng)干 燥箱 ( 上海博迅醫(yī)療設(shè)備有限公司) 。

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    CAT 同工酶用 鐵染色法,SOD 同工酶用氮藍(lán)四唑法,POD 同工酶 用聯(lián)苯胺法。取 0. 1 g 根莖,液氮研磨,加入 10 mmol /L Tris - HCl PH 7. 4 緩沖液,料液比 1∶ 10,浸 提 24 h,10000 rpm 離心 10 min,取上清液,加入等量 40% 蔗糖溶液于 - 20℃ 冰箱保存?zhèn)溆?,采用聚丙? 酰胺凝膠垂直版電泳系統(tǒng)分析。SOD 和 POD 采用 濃度為 10% 分離膠,CAT 為 7. 5% 分離膠,濃縮膠均 為 3% 的分離度,Tris - Gly( PH 8. 3) 作為電泳緩沖 液,上樣量為 20 μl,電泳在冰上進(jìn)行,濃縮膠電流 15 mA,溴酚藍(lán)指示劑通過分離膠改為 20 mA,電泳 至含 40% 蔗糖溶液的溴酚藍(lán)指示劑遷移至距膠板 1 cm 時 停 止 電 泳。數(shù)據(jù)處理采用 Excel 2010,SPSS 19. 0 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析,用單因素方差分析( One - way ANOVA) 和最小顯著差異法( Least significant difference,LSD 法) 進(jìn)行數(shù)據(jù)顯著性分析。





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